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<strong>Figure 1.</strong> Schéma de synthèse d’un peptide bicyclique ramifié de 21aa combinant les deux approches : phase solide et phase liquide.<br/>
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Nous préparons des peptides totalement caractérisés pour la recherche. Les quantités vont de quelques mg à plusieurs grammes. La plupart des synthèses sont réalisées en phase solide avec la chimie Fmoc mais une synthèse en phase liquide peut être utilisée lorsque la structure ou la séquence du peptide l’impose. Les peptides sont ensuite purifiés à différents niveaux de pureté, en utilisant la HPLC en phase inverse. Nous nous tenons à votre disposition pour vous conseiller sur le niveau de pureté optimum adapté à vos applications. Nos peptides sont destinés uniquement à la recherche in vitro et ne peuvent pas être utilisés pour des applications médicales ou diagnostiques. 

Gammes de synthèse standard

Les gammes de synthèse les plus fréquemment demandées sont présentées dans le tableau ci-dessous. Mais nous préparons couramment des quantités plus importantes (jusqu’à plusieurs grammes) et des peptides plus longs. Merci de nous contacter avec votre/vos séquence(s),la quantité et le niveau de pureté, nous ne manquerons de vous répondre et de faire une proposition intéressante.

Groupes de tarifs(I-V)
en fonction de
l'échelle de synthèse (mg)
(I) 2 mg (quantité minimale)
(II) 5 mg à 30 mg par incréments de 5 mg
(III) 30 mg à 100 mg par incréments de 10 mg
(IV) 0,1 g à 1 g ipar incréments de 50 mg
(V) 1 g à 10 g par incréments de 500 mg
Niveaux de pureté: >70%, >80%, >90%, >95% et >99%
Données analytiques: profil HPLC (220 nm), Spectre de masse (MALDI-TOF, EI), test de solubilité
Longueur de chaîne: Standard:5-30 aa ; Routine: 31-60 aa ; Longueur maximale: environ 100 aa
Structure : Extrémités libres (i.e. NH2- and-COOH )
Contre-ion: Standard: Trifluoroacétate (tfa); Option: Acétate ou chlorure
Form: Lyophilisat

Purification par HPLC en phase inverse

<strong>Figure 2. </strong>Analyse par HPLC en phase inverse d’un peptide de 10 aa contenant deux acides aminés aromatiques (tyr) avec détection à 2 longueurs d’onde 220nm et 280nm. La simultanéité des 2 pics d’absorption confirme la pureté du produit. (colonne C8 4.6x250mm, 5μm. Gradient 15-50% d’acétonitrile en solution aqueuse de tfa à 0.1% en 25 min, débit 1ml/min.)
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<strong>Figure 3. </strong>Chaque peptide subit un contrôle qualité sévère comprenant un profil HPLC et un spectre de masse.
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Les niveaux de pureté garantis obtenus par HPLC sont : >70%, >80%, >90%, >95% et un niveau unique ultra-pur >99%. 

 

La purification est réalisée par HPLC en phase inverse préparative ou semi-préparative. Généralement, des colonnes C8 ou C18 sont utilisées et l’élution est effectuée par des gradients linéaires d’acétonitrile en solution aqueuse à 0,1% de tfa et suivie par UV à 220 nm. 

Le suivi de l’élution peut se faire à une plus grande longueur d’onde pour des peptides contenant des acides aminés aromatiques. 

Le peptide de synthèse brut contient des sous-produits provenant des cycles de couplage avortés (i.e. des chaînes tronquées), et ensuite de l’oxydation, modification, ou hydrolyse des chaînes latérales survenant lors du clivage et de la déprotection. Les quantités d’impuretés dépendent de la longueur du peptide et de sa séquence. Nous sommes à votre disposition pour vous conseiller un niveau de pureté adapté à votre propre application conformément aux grandes lignes ci-après . 

- Pureté >70% : Production d’anticorps polyclonaux ; criblage initial d’une bibliothèque de peptides ; un niveau de pureté plus élevé est normalement préférable pour des peptides de plus de 20 aa. 

- Pureté >80% : Production d’anticorps polyclonaux avec des peptides longs ou anticorps mono-spécifiques ; immuno-essais qualitatifs (ELISA, compétition…). 

- Pureté >90% : Production d’anticorps polyclonaux mono-spécifiques ; préparation de colonne d’affinité ; essais biochimiques qualitatifs (activité, spécificité enzymatiques…). 

- Pureté >95% : immuno-essais quantitatifs (ELISA, compétition…) ; essais biochimiques quantitatifs (activité, spécificité, cinétique enzymatiques …) ; généralement recommandé pour des peptides modifiés ; études structurelles préliminaires. 

- Pureté >99%, ultra-pur : essais en culture cellulaire ; bio-essais quantitatifs, études structurelles (Crystallographie, RMN…).

[Translate to Français:] Counter ions exchange option

[Translate to Français:] Peptides are charged molecules. Standard reversed-phase HPLC purification allows for the isolation of pure peptides that are further freeze-dried yielding peptides preparations that comprise trifluoroacetate (tfa, CF3COO-) as counter-ions. Some applications require the removal of tfa. We offer ion exchange option to acetate (CH3COO-) or chlorine (Cl-) salts.

Contrôle qualité

Nous avons conscience que la qualité et la fiabilité sont essentielles pour nos clients. Aussi, aucun peptide ne quitte nos laboratoires s’il ne satisfait pas rigoureusement à nos critères de qualité.

Livraison rapide de produits fiables

Tous nos peptides sont pesés et livrés sous forme de poudre lyophilisée stable, accompagnés d’un rapport complet. Le profil HPLC confirme le niveau de pureté et le spectre de masse montre l’intégrité du peptide. 

Les délais de fabrication dépendent de la longueur de la séquence, de la quantité, du niveau de pureté et des modifications souhaités. Les délais moyens pour nos offres classiques sont donnés à titre indicatif dans le tableau ci-après. Nos clients sont informés de tout retard dû à des difficultés de synthèse.

Gamme 25 mg, >70% 25 mg, >80% 25 mg, >90% 25 mg, >95% 25 mg, >99%
Délai moyen (*) 2 semaines 2 - 3 semaines 2 - 3 semaines 3 semaines 3 - 4 semaines
(* Peptides 15 à 20 aa)

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