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POUR LA RECHERCHE
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POUR LA RECHERCHE
Système baculovirus/
Le système baculovirus-cellules d’insectes est largement utilisé pour produire des protéines recombinantes à partir d’un large éventail d’organismes. Il utilise une machinerie cellulaire eucaryote supérieure et produit généralement des protéines surexprimées avec un repliement et une liaison disulfure appropriés.
La localisation cellulaire est généralement identique à celle de la protéine native et il a été démontré que la plupart des modifications post-traductionnelles trouvées dans les organismes supérieurs se produisent généralement aux mêmes endroits.
Ces derniers processus cellulaires comprennent le clivage du peptide signal, la N- et O-glycosilation, la phosphorylation, l’acétylation, l’amidation, etc.
Description du service
Tous les services comprennent plusieurs étapes, du gène à la protéine purifiée, comme décrit dans le tableau ci-dessous.
Le délai de réalisation est d’environ 10 à 14 semaines.
| Description | Matériel résultant | Délai d'exécution moyen (*) |
| Synthèse de gène | ||
| - Optimisation des codons - Synthèse du gène - Clonage dans le plasmide standard pUC - Séquençage complet |
Gène cloné, synthétisé et vérifié | 2 semaines |
| Sous-clonage pour l'expression | ||
| - Préparation des plasmides - Sous-clonage - Sélection du clone - Séquençage complet |
Vecteur plasmidique avec gène cible cloné | .2 semaines |
| Expression du pilote | ||
| - Expériences pilotes d'expression et d'optimisation - Choix de l'hôte le plus approprié - Ajustement des conditions de culture - Détermination des rendements et du comportement des protéines |
10-50 µg de protéine semi-purifiée | 2-3 semaines |
| Expression et purification | ||
| - Expression - Extraction de la protéine - Purification de la protéine - SDS-PAGE, WESTERN blot |
Protéine purifiée | 2-3 semaines |
(*) Temps de production moyen pour un projet moyennement difficile. Le délai d'exécution réel varie en fonction des caractéristiques du projet..