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La synthèse de gènes à façon par Genosphere Biotechnologies

 

Genosphere Biotechnologies produit les gènes par une approche multi-étapes en s'appuyant sur notre application exclusive d'élaboration des séquences d'oligonucléotides et sur notre savoir-faire dans la méthode d'assemblage d'ADN macromoléculaire établi au fil des 20 dernières années.

 

1• Chaque gène est élaboré par synthèse à partir des oligonucléotides.

2• L’ADN synthétique est assemblé et cloné dans le plasmide standard dérivé de pUC ou dans n’importe quel vecteur de votre choix.

3• Les colonies tranformées sont examinées et cinq colonies positives sont sélectionnées, amplifiées et purifiées.

4• La vérification de la taille et des sites de restriction est faite par électrophorèse sur gel d’agarose.

5• Le clone sélectionné est ensuite séquencé dans les deux directions et les traces fluorescentes sont fournies pour vous permettre de vérifier l’exactitude de la séquence.

 

Les séquences synthétisées sont toutes garanties.

 

 

 Le service classique de synthèse de gène comprend :

  • L’optimisation de codons pour l’expression hétérologue.
  • Ingénierie de séquences : addition ou élimination de caractéristiques de la séquence, par exemple étiquettes pour la purification, sites de restriction, changement d’acides aminés pour les études de relation stucture-activité, etc.
  • Synthèse totale de novo de gènes selon vos spécifications.
  • Clonage, sélection, amplification et purification de votre clone : en standard le clonage est réalisé dans un plasmide dérivé de pUC (AmpR). Mais en option, nous pouvons insérer votre gène dans n’importe quel vecteur que vous nous fournirez.
  • Séquençage double-brin de votre gène.

Nous fournissons : 
5 µg de plasmide purifié, les données de séquençage et un rapport de synthèse complet.


Services de mutagénèse

 

Il est possible d’introduire n’importe quel type de mutations dans votre gène.

 

Mutagénèse dirigée

  Mutations dirigées ponctuelles faux-sens:  transitions / transversions - conservative/non-conservative

  Mutations dirigées ponctuelles simultanées en plusieurs sites.

  Mutations dirigées ponctuelles avce conservation du cadre de lecture:  deletions or insertions

  5'- / 3'- in-frame troncations

  5'- / 3'- additions-fusions

 

Mutagénèse aléatoire

Des mutations ponctuelles faux-sens peuvent être introduites de façon aléatoire dans une région localisée de votre ORF cible.

 

 

Sont fournis 5 µg de plasmide purifié et les données de séquençage double-brin pour chaque mutant

 

 

Les applications sont nombreuses, y compris:

  •      Introduction de Tags
  •      Elaboration de protéines de fusion
  •      Etudes de fonction et d'activité et éventuellement d'optimisation
  •      Echanges de domaine
  •      Etude knockout

Services complémentaires

     

 

Service de sous-clonage

Le service de synthèse de gène standard comprend le clonage de votre ADN dans un plasmide dérivé de pUC.  Votre séquence ADN peut aussi être clonée dans n’importe quel vecteur de votre choix: 

  • Vecteur pour l'expression
  • Vecteur avec marqueur pour la purification
  • Vecteur pour la fusion avec une protéine fluorescente

Votre gène serait ainsi prêt à utiliser dans votre expérience. Nous pouvons également réaliser vos projets de clonage complexes impliquant plusieurs fragments

Merci de nous fournir 5 μg de plasmide purifié ainsi que la séquence complète.

 

 

Préparation de plasmides

Le service de synthèse de gène standard comprend la livraison de 5 µg de votre plamide cloné.

Nous vous proposons la préparation à grande échelle de vos ADN à un prix attractif.

Préparation de plasmide50 µg
Préparation de plasmide100 µg
Préparation de plasmide500 µg
Préparation de plasmide1 mg

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