Expression chez la levure

 

La levure est un système d'expression eukaroytique très économique qui présente de nombreuses modifications post-traductionnelles produisant des protéines fonctionnelles.  Comme l'activité biologique des protéines dépend fortement du repliement approprié et des glycosylations spécifiques ainsi que d'autres modifications (phosphorylation, acétylation, etc.), le système d'expression de la levure peut être une alternative avantageuse à l'expression bactérienne.

L'équipe de Genosphere Biotechnologies exprimera votre protéine soit sous forme de protéine hétérologue sécrétée, soit par expression intracellulaire.

 


Description du service

Tous les services comprennent de multiples étapes allant du gène à la protéine purifiée, tel que décrit dans le tableau ci-dessous.

 

Le processus de production se déroule sur environ 10-12 semaines.

Description Matériel obtenu Délais moyens (*)
Etape 1: Synthèse de gène
-Optimisation des codons
-Synthèse du gène
-Clonage dans un plasmide pUC
-Séquençage complet
Votre gène synthétisé, cloné et vérifié 1-2 semaines
Etape 2: Sous-clonage
-Préparation du plasmide
-Sous-clonage dans votre vecteur d'expression
-Sélection de clones
-Séquençage complet
Votre gène cloné dans votre vecteur d'expression 2-3 semaines
Etape 3: Expression pilote
-Préparation de votre clone
-Transformation
-Expression et optimisation
-Estimation du rendement et comportement physico-chimique de la protein
10-50 µg de protéine semi-purifiée 2-3 semaines
Etape 4: Expression et purification
-Expression à l'échelle
-Extraction de la protéine
-Purification
-SDS-PAGE, WESTERN blot
0.5-5 mg de protéine purifiée 2-3 semaines

 

(*) Estimation des délais de production pour un project de difficulté moyenne. Le délai exact dépend des caractéristiques particulières de votre projet.

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