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Figura 1. Ruta sintética esbozada para la síntesis de un péptido bicíclico y ramificado de 21 aa que incluía una combinación de enfoques de química en fase sólida y en solución.
Ruta sintética esbozada para la síntesis de un péptido bicíclico y ramificado de 21 aa que incluía una combinación de enfoques de química en fase sólida y en solución.

 

Sintetizamos péptidos completamente caracterizados para la investigación. Proponemos cantidades desde algunos miligramos hasta varios gramos. La mayoria de las síntesis se realizan en fase sólida sobre resina, utilizando la química Fmoc. Sin embargo, se puede realizar la síntesis en fase líquida si la estructura o la secuencia lo necesita. Los péptidos son purificados después, por HPLC en fase inversa, hasta varios niveles de pureza. Estamos a su disposición para aconsejarle sobre el nivel de pureza óptimo acorde con sus aplicaciones. Nuestros péptidos no deben utilizarse para aplicaciones médicas o diagnósticas sino, únicamente, para la investigación in vitro.

 

 

1• Gama de síntesis estándar

 

Más abajo se exhibe la gama de las síntesis más frecuentemente pedidas. Sin embargo, preparamos corrientemente cualquier cantidad y péptidos más largos. Gracias por contactarnos indicando su/sus secuencia(s), la cantidad y el nivel de pureza deseados. No faltaremos de contestarle y de hacerle una propuesta ventajosa.

Genosphere Biotechnologies: Plazos de síntesis muy breves.  Plazos de síntesis muy breves.Solicite su presupuesto de síntesis de péptidos, péptidos modificados, péptidos largos, péptidos hidrofóbicos, forma D, péptidos PEG péptidos cíclicos, fosfopéptidos, péptidos marcados con biotina, fluorescentes, péptidos marcados con isótopos pesados.

  Genosphere Biotechnologies: 97%+ de éxito en la síntesis. 97%+ de éxito en la síntesis.

Genosphere Biotechnologies: Genosphere Biotechnologies:Calidad garantizada.  Calidad garantizada.


Nuestros grupos de precios (I-VI)
dependiendo de
la cantidad de péptido (mg)
(I) 2 mg (cantidad mínima)
(II) 5 mg - 30 mg en incrementos de 5 mg
(III) 30 mg - 100 mg en incrementos de 10 mg
(IV) 0,1 g - 1 g en incrementos de 50 mg
(V) 1 g - 10 g en incrementos de 500 mg
(VI) >10 g
Niveles de pureza: >70%, >80%, >90%, >95% y >99%
Datos analíticos: Perfil HPLC (220 nm), espectro de masas (MALDI-TOF, EI), prueba
de solubilidad
Longitud de cadena: Estándar: 5 a 30 aa ; frecuente: 31 a 60 aa ; máxima: unos 100 aa
Estructura: Extremos libres (i.e. NH2- y -COOH )
Contraiones: Estándar: trifluoroacetate (tfa) ; Option: acetate o cloruro
Forma: Liofilizados




2• Purificación por HPLC en fase inversa

Figura 2. Análisis por HPLC en fase inversa de un péptido de 10 aa que contiene dos aminoácidos aromáticos (tyr) con detección a 2 longitudes de onda 220nm y 280nm. La simultaneidad de los 2 picos de absorción confirma la pureza del producto. (Columna C8 4,6x250mm, 5μm. Gradiente 15-50% de acetonitrilo en solución acuosa de tfa al 0,1% a lo largo de 25 min, caudal 1ml/min).
Figura 2. Análisis por HPLC en fase inversa de un péptido de 10 aa que contiene dos aminoácidos aromáticos (tyr) con detección a 2 longitudes de onda 220nm y 280nm. La simultaneidad de los 2 picos de absorción confirma la pureza del producto.

 

Los niveles garantizados de pureza obtenidos por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) son: >70%, >80%, >90%, >95% y un nivel único ultra-puro >99%

 

La purificación se realiza por HPLC en fase inversa a escala preparativa o semipreparativa generalmente en las siguientes condiciones: columnas C8 o C18, elución por gradientes lineales de acetonitrilo en solución ácuea de TFA 0,1% y detección UV a 220 nm

Para péptidos que incluyen aminoácidos aromáticos, la detección UV se efectua a una longitud de onda superior . 

El péptido sintético crudo contiene subproductos que resultan de los ciclos de acoplamiento abortados (i.e. cadenas truncadas) y, después, de la oxidación, modificación o hidrólisis de las cadenas laterales occuriendo durante el corte y la deprotección. La cantidad de impurezas depende de la secuencia y de la longitud del péptido.

 

Estamos a su disposición para aconsejarle sobre el nivel de pureza óptimo acorde con sus aplicaciones, en conformidad con las líneas generales siguientes: 

 

Aplicaciones experimentales y niveles de pureza recomendados

Pureza >70%
Cribado de péptidos; producción de anticuerpos policlonales; muestreo preliminar de una biblioteca de péptidos; niveles de pureza superiores son generalmente preferibles para péptidos de más de 20 aa.
Pureza >80%
Ensayos bioquímicos de cribado; inmunoensayos cualitativos (ELISA, competencia, depleción...); producción de anticuerpos policlonales con péptidos largos.
Pureza >90%
Bioensayos preliminares de péptidos candidatos; producción de anticuerpos policlonales monoespecíficos; fabricación de columnas de afinidad; estudios de estructura-actividad; pruebas bioquímicas cualitativas (actividad enzimática, especificidad...).
Pureza >95%
Inmunoensayos cuantitativos (ELISA, competencia, depleción...); ensayos bioquímicos cuantitativos (actividad enzimática, cinética...); generalmente recomendados para péptidos modificados; análisis estructural preliminar (RMN,...).
Pureza >99%, ultrapuro
Ensayos de cultivos celulares; bioensayos cuantitativos; ;estudios estructurales (Cristalografía, RMN…).



 

 

3• Extremos de péptidos

 

Nuestros péptidos se sintetizan normalmente con extremos no bloqueados:

Extremo N-terminal: grupo amino (H2N-) y extremo C-terminal: grupo carboxílico (-COOH).

 

Los valores de pKa del grupo alfa-amino y del grupo ácido carboxílico indican que los extremos del péptido están generalmente cargados eléctricamente a pH fisiológico.

 

En algunos casos, puede ser preferible neutralizar estas cargas eléctricas utilizando grupos "bloqueadores".  Para ello, los extremos de los péptidos suelen modificarse mediante :

Acetilación N-terminal y/o amidación C-terminal.

Los péptidos con grupos N-acetilo y C-amida imitan así las secuencias internas porque tienen extremos sin carga. Además, estos grupos bloqueadores mejoran la resistencia a la degradación enzimática. Cabe señalar que esta neutralización de la(s) carga(s) suele conllevar también una disminución de la solubilidad.

 

 

4• Contra-iones

 

Los péptidos son moléculas cargadas. La purificación estándar por HPLC en fase inversa se realiza en disolventes que incluyen trifluoroacetato (tfa, CF3COO-) y permite el aislamiento de péptidos puros.  La fracción de péptidos puros se liofiliza posteriormente, dando lugar a una preparación de péptidos que incluye trifluoroacetato (tfa, CF3COO-) como contra-iones. Algunas aplicaciones requieren la eliminación del tfa.

Servicios de intercambio TFA

Ofrecemos la opción de intercambio iónico con sales de acetato (CH3COO-) o de cloro (Cl-).

 

 

5• Control de calidad: péptidos garantizados

 

Estamos muy concienciados por la calidad y la fiabilidad de los productos deseados por nuestros clientes. Por eso, ningún péptido sale de nuestro laboratorio a no ser que nuestros criterios de calidad sean satisfechos rigurosamente.

 

 

6• Entrega rápida de productos fiables

 

Todos nuestros péptidos se envían en forma de polvo liofilizado estable y van acompañados de un informe completo de síntesis. El informe de síntesis estándar incluye una traza analítica de HPLC que verifica la pureza, un espectro de masas que garantiza la integridad del péptido de longitud completa deseado y las condiciones de disolución.
Los plazos de producción dependen de la longitud de la secuencia, de la cantidad, del nivel de pureza y de las modificaciones deseadas.
A continuación se exhiben los plazos medios para los productos de nuestra oferta estándar. Les informamos de todo retraso debido a dificultades de síntesis.

Síntesis 25 mg, >70% 25 mg, >80% 25 mg, >90% 25 mg, >95% 25 mg, >99%
Como promedio (*) 2 semanas 2 - 3 semanas 2 - 3 semanas 3 semanas 3 - 4 semanas
(* Péptidos 15 a 20 aa)

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