SERVICIOS
PARA LA INVESTIGACION
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SERVICIOS
PARA LA INVESTIGACION
El sistema baculovirus-células de insecto se utiliza ampliamente para producir proteínas recombinantes a partir de una amplia gama de organismos. Utiliza una maquinaria celular eucariota superior y suele producir proteínas sobreexpresadas con un plegamiento y un enlace disulfuro adecuados.
La localización celular suele ser idéntica a la de la proteína nativa y se ha demostrado que la mayoría de las modificaciones postraduccionales encontradas en organismos superiores suelen producirse en los mismos lugares.
Estos últimos procesamientos celulares incluyen la escisión del péptido señal, la N- y O-glicosilación, la fosforilación, la acetilación, la amidación, etc.
Descripción del servicio
Todos los servicios incluyen múltiples pasos desde el gen hasta la proteína purificada, como se describe en la tabla siguiente.
El plazo de entrega es de aproximadamente 10-14 semanas.
| Description | Resulting Material | Average turnaround (*) |
| Gene Synthesis Stage | ||
| -Codon optimization -Gene synthesis -Cloning in standard pUC plasmid -Complete sequencing |
Cloned, synthesized and verified gene | 1-2 weeks |
| Subcloning in Baculovirus Transfer Vector Stage | ||
| -Plasmid prep -Subcloning Bac-donor vector -Clone selection -Complete sequencing |
Plasmid vector with cloned target gene | 2 weeks |
| Bacmid Generation Stage | ||
| -Plasmid prep -Recombinant bacmid selection -Recombinant bacmid DNA isolation -DNA Verification |
Bacmid DNA with cloned target gene | 2 weeks |
| Insect Cells Transfection Stage | ||
| -Multiple Sf9 transfection experiments -Virus titering -SDS-PAGE / Western blot analysis |
High titer recombinant baculovirus stock | 3 weeks |
| Pilot Expression Stage | ||
| -Expression pilot and optimization experiments -Determine yields and protein behavior |
10-50 µg of semi-purified protein | 1-2 weeks |
| Expression and Purification Stage | ||
| -Expression -Protein extraction -Protein purification -SDS-PAGE, WESTERN blot |
0.1 to 3 mg of purified protein Purity >95% |
2-3 weeks |
(*) Average production time for average difficult project. Actual turn around time varies with individual project features.