Pour la recherche
L’expression de protéines chez E. coli est le plus économique et le plus couramment utilisé. Il est particulièrement adapté à la préparation d'antigènes, de ligands, de cytokines ou de protéines bactériennes. La relative simplicité du système et la connaissance de la génétique des hôtes en ont fait un système de choix. Par ailleurs, E. coli a courte période de culture et offre la possibilité d’obtenir des rendements élevés.
Au cours des dernières décennies, le système d'expression E. coli a été développé et est bien documenté par son utilisation intensive en recherche et dans l'industrie pour un grand nombre d'expression de protéines recombinantes.
Description du service
La production de protéine recombinante comprend plusieurs étapes allant du gène à la protéine purifiée, comme décrit dans le tableau ci-dessous.
Le délai de production est d'environ 8 à 10 semaines.
Description | Resulting Material | Average turnaround (*) |
Gene synthesis | ||
-Codon optimization -Gene synthesis -Cloning in standard pUC plasmid -Complete sequencing |
Cloned, synthesized and verified gene | 2 weeks |
Subcloning for expression | ||
-Plasmid prep -Subcloning -Clone selection -Complete sequencing |
Plasmid vector with cloned target gene | 2 weeks |
Pilot expression | ||
-Expression pilot and optimization experiments -Choice of most suitable host -Adjust culture conditions -Determine yields and protein behavior |
10-50 µg of semi-purified protein | 2-3 weeks |
Expression and purification | ||
-Expression -Protein extraction -Protein purification -SDS-PAGE, WESTERN blot |
Purified protein | 2-3 weeks |
(*) Average production time for average difficult project. Actual turn around time varies with individual project features.