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Proteinexpression in E. coli
Die Expression von Proteinen in E. coli ist die kostengünstigste und am häufigsten verwendete Methode. Es eignet sich besonders für die Herstellung von Antigenen, Liganden, Zytokinen oder bakteriellen Proteinen. Die relative Einfachheit des Systems und die Kenntnis der Wirtsgenetik haben es zu einem System der Wahl gemacht. Darüber hinaus hat E. coli eine kurze Kulturdauer und bietet die Möglichkeit, hohe Erträge zu erzielen.
In den letzten Jahrzehnten wurde das E. coli-Expressionssystem weiterentwickelt und durch seinen intensiven Einsatz in der Forschung und bei industriellen Anwendern für eine Vielzahl von rekombinanten Proteinexpressionen dokumentiert.
Beschreibung der Dienstleistung
Die Herstellung von rekombinantem Protein umfasst mehrere Schritte vom Gen bis zum gereinigten Protein, wie in der nachstehenden Tabelle beschrieben.
Die Produktionszeit beträgt etwa 8 bis 10 Wochen.
| Description | Resulting Material | Average turnaround (*) |
| Gene synthesis | ||
| -Codon optimization -Gene synthesis -Cloning in standard pUC plasmid -Complete sequencing |
Cloned, synthesized and verified gene | 2 weeks |
| Subcloning for expression | ||
| -Plasmid prep -Subcloning -Clone selection -Complete sequencing |
Plasmid vector with cloned target gene | 2 weeks |
| Pilot expression | ||
| -Expression pilot and optimization experiments -Choice of most suitable host -Adjust culture conditions -Determine yields and protein behavior |
10-50 µg of semi-purified protein | 2-3 weeks |
| Expression and purification | ||
| -Expression -Protein extraction -Protein purification -SDS-PAGE, WESTERN blot |
Purified protein | 2-3 weeks |
(*) Durchschnittliche Bearbeitungszeit und Herstellungsdauer. Die tatsächliche Lieferzeit kann in Abhängigkeit von z.B. DNA-Sequenz, Reinigungsschritten usw. davon abweichen. Wir informieren Sie per E-Mail zeitnah über den aktuellen Stand Ihres Projektes.