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Kundendienst
für Forschung
Die kundenspezifischen Antikörper von Genosphere (Antiseren, aufgereinigte polyklonale und monoklonale Antikörper sowie Hühner-IgY) werden lyophilisiert geliefert und bleiben so während Transport und Lagerung stabil. Mit den folgenden Empfehlungen erhalten Sie die Aktivität Ihrer Antikörper vom Wareneingang bis zum Experiment. Chargenspezifische Angaben wie Rekonstitutionsvolumen und Endkonzentration finden Sie im Produktionsbericht zu Ihrem Projekt.
Auf einen Blick
- Versand: Raumtemperatur
- Lyophilisiert, kurzfristig: 2–8 °C
- Lyophilisiert, langfristig: −20 °C, mindestens ein Jahr stabil
- Rekonstituiert, kurzfristig: 2–8 °C, 1–2 Wochen (sterile Lösungen)
- Rekonstituiert, langfristig: −20 °C oder kälter, in Einmal-Aliquots, bis zu 12 Monate
- Konservierungsmittel: 0,02 % Natriumazid (sofern nicht anders angegeben)
Lyophilisierte Antikörper: bei Erhalt
Unsere lyophilisierten Antikörper werden bei Raumtemperatur versendet. Prüfen Sie bei Erhalt, ob die Fläschchen unversehrt sind, und lagern Sie sie unter den oben angegebenen Bedingungen. Rekonstituieren Sie sie erst, wenn Sie den Antikörper verwenden oder Aliquots für die Lagerung vorbereiten möchten.
Rekonstitution
Rekonstituieren Sie jedes Fläschchen mit sterilem deionisiertem Wasser, und zwar genau mit dem Volumen, das im Produktionsbericht angegeben ist. Dort finden Sie auch die Endkonzentration.
- Antiseren und Präimmunseren (Kaninchen, Meerschweinchen, Ratte, Maus): Die Rekonstitution stellt das ursprüngliche Serumvolumen wieder her.
- Aufgereinigte Antikörper (Gesamt-IgG, affinitätsgereinigte und monoklonale Antikörper): Die Rekonstitution stellt die ursprüngliche Pufferformulierung in der angegebenen Konzentration wieder her.
- Hühner-IgY (Präimmun-IgY und aufgereinigtes IgY): gemäß den Angaben im Produktionsbericht rekonstituieren.
Lagerung und Stabilität
Vor der Rekonstitution: bei 2–8 °C lagern. Für die Langzeitlagerung bei −20 °C aufbewahren; dort bleibt das Produkt mindestens ein Jahr stabil.
Nach der Rekonstitution:
- Bei −20 °C oder kälter: bis zu 12 Monate für Antiseren und konzentrierte Antikörperlösungen (≥ 1 mg/ml)
- Bei 2–8 °C: 1–2 Wochen für sterile Lösungen
Monoklonale und polyklonale Antikörper lagern
Für monoklonale und polyklonale Antikörper gelten dieselben Grundprinzipien der Lagerung. Die Stabilität hängt vom jeweiligen Antikörper, seiner Konzentration und seiner Formulierung ab.
- Antiseren und aufgereinigte polyklonale Antikörper enthalten Antikörper, die unterschiedliche Epitope erkennen. Ein Aktivitätsverlust einzelner Antikörperpopulationen kann das Gesamtsignal verringern; wie stark, hängt davon ab, welche Populationen zum Assay beitragen.
- Monoklonale Antikörper erkennen ein einziges Epitop. Ein Verlust der Bindungsaktivität kann das Signal verringern oder ganz aufheben; monoklonale Antikörper sind bei der Lagerung jedoch nicht zwangsläufig weniger stabil als polyklonale.
- Antiserum enthält reichlich Serumproteine, die zur Stabilisierung der Antikörper während der Lagerung beitragen können.
- Aufgereinigte Antikörper können nach dem Verdünnen anfälliger für Oberflächenadsorption und Aktivitätsverlust sein, insbesondere ohne Trägerprotein.
Wiederholtes Einfrieren und Auftauen vermeiden
Wiederholte Einfrier-Auftau-Zyklen können zu Aggregation und Aktivitätsverlust führen. Für die Lagerung in gefrorenem Zustand teilen Sie die rekonstituierte Lösung in Einmal-Aliquots auf und tauen jeweils nur die benötigte Menge auf.
Gute Lagerpraxis
- Verwenden Sie Röhrchen mit geringer Proteinbindung für Aliquots, besonders bei aufgereinigten Antikörpern in niedriger Konzentration. Setzen Sie Aliquots nach Möglichkeit mit mindestens 10 µl an, um Verdunstung und Oberflächenverluste gering zu halten.
- Schützen Sie konjugierte Antikörper vor Licht, insbesondere Fluorophor-Konjugate. Enzymkonjugate (HRP, AP) und Konjugate mit Protein-Fluorophoren (PE, APC) müssen häufig bei 2–8 °C gelagert statt eingefroren werden; beachten Sie die Hinweise zum jeweiligen Konjugat.
Lagerpuffer und Arbeitsverdünnungen
Die Rekonstitution mit dem angegebenen Volumen sterilen deionisierten Wassers stellt die gelieferte Formulierung wieder her; ein zusätzlicher Lagerpuffer ist nicht erforderlich. Weitere Punkte sind zu beachten, wenn Sie einen Antikörper für die Anwendung verdünnen.
- Puffer und pH-Wert. PBS oder TBS mit pH 7,2–7,6 eignet sich für viele Antikörper; wählen Sie einen mit Ihrem Assay kompatiblen Puffer.
- Trägerprotein. Verdünnte Antikörper können an Röhrchenoberflächen adsorbieren, wodurch die effektive Antikörperkonzentration sinkt. Wenn Sie einen verdünnten Antikörper aufbewahren müssen, kann ein Trägerprotein wie 0,1–1 % BSA diesen Verlust begrenzen, vor allem bei aufgereinigten Antikörpern in niedriger Konzentration. Verzichten Sie auf BSA, wenn es Ihren Assay stört oder wenn Sie den Antikörper konjugieren möchten.
- Glycerin. Sofern mit dem Antikörper und der geplanten Anwendung vereinbar, kann Glycerin bis zu einer Endkonzentration von 50 % (v/v) zugesetzt werden, damit die Stammlösung bei −20 °C flüssig bleibt. Ausgehend von einer glycerinfreien Stammlösung mischen Sie gleiche Volumina Antikörperlösung und hochreines Glycerin in Laborqualität. Dadurch halbiert sich die Antikörperkonzentration. Lagern Sie diese Lösungen bei −20 °C; bei −80 °C können sie gefrieren.
- Arbeitsverdünnungen im Assaypuffer setzen Sie am besten am Tag der Verwendung an.
Schwächeres Signal? Hier zuerst prüfen
Ein schwächeres Signal kann auf Veränderungen am Antikörper, an der Probe oder an den Assaybedingungen zurückgehen. Prüfen Sie folgende Punkte:
- Wurde der Antikörper wiederholt eingefroren und aufgetaut? Vergleichen Sie, falls verfügbar, mit einem frischen Aliquot.
- Wie lange steht der rekonstituierte Antikörper schon bei 2–8 °C? Beachten Sie die oben genannte Lagerdauer von 1–2 Wochen; wurde sie überschritten, vergleichen Sie mit einem wie empfohlen eingefrorenen Aliquot.
- Wurde der Antikörper nach dem Verdünnen ohne Trägerprotein aufbewahrt? Oberflächenadsorption kann seine effektive Konzentration verringert haben.
- Ist die Lösung trüb, oder enthält sie einen Niederschlag? Trübung oder Niederschlag können auf Aggregation oder Kontamination hindeuten. Durch Zentrifugieren lässt sich unlösliches Material entfernen, die Aktivität des Antikörpers wird dadurch jedoch nicht unbedingt wiederhergestellt.
- Enthält ein HRP-Konjugat oder die Substratlösung Azid? Es kann die Nachweisreaktion hemmen.
- Haben sich Probe oder Assaybedingungen geändert? Überprüfen Sie Lysatherstellung, Fixierung, Antigendemaskierung und Nachweisreagenzien, und setzen Sie nach Möglichkeit eine geeignete Positivkontrolle ein.
Zur Lagerung der als Antigene verwendeten Peptide siehe Lagerung und Handhabung von Peptiden. Für ein neues Projekt siehe Antikörperproduktion.
Nur für Forschungszwecke
Die Produkte sind ausschließlich für Forschungszwecke bestimmt und nicht für medizinische, diagnostische oder veterinärmedizinische Anwendungen vorgesehen.
Fragen? Unser technisches Team hilft Ihnen gerne weiter.