Spécifications des échantillons

Spécifications des échantillons

Quantité d’échantillon

20 pmoles de protéine transférée sont le minimum indispensable. 50 pmoles sont préférables pour obtenir des résultats sans ambiguités.

Taille de protéine µg pour 20 pmoles
10 kDa 0.2
25 kDa 0.5
50 kDa 1.0
75 kDa 1.5
100 kDa 2.0
125 kDa 2.5

Forme des échantillons

Nous acceptons les échantillons transférés sur membranes PVDF ou les protéines purifiées lyophilisées ou en solution.

Transféré sur membrane PVDF (de préférence)

La protéine doit être transférée à partir de gel 1D ou 2D et colorée par le bleu de Coomassie (R250). Après la coloration et la décoloration les membranes seront soigneusement rincées à l’eau désionisée. Les bandes doivent être aussi concentrées que possible (15 à 20 pmoles / puits) et plusieurs bandes peuvent être fournies. Vous pouvez également fournir la membrane entière avec une photocopie indiquant la bande qui vous intéresse ou des bandes découpées en nous communiquant le(s) poids moléculaire(s).

En solution ou lyophilisée

30 à 150 µl de solution (H2O, Acétonitrile, Propanol) ou protéine pure lyophilisée. 
La protéine ne doit contenir ni détergent, ni sels, ni tampons. Notez également que tout contaminant contenant un groupement amine (e.g. Tris) pertubera l’étape de dérivatisation. 
Tous les échantillons sous ces formes sont soumis à une pré-purification qui est facturée en sus.

Pureté des échantillons

Membranes PVDF : La bande doit être bien séparée et apparaître bien distincte du reste des bandes présentes. 
En solution : Protéine unique purifiée. Veuillez noter que les échantillons obtenus par immuno-précipitation ou purifiés par affinité conduisent généralement à de bons résultats. 
Tous les échantillons en solution font l’objet d’ une purification supplémentaire préalable.

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