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Séquençage N-terminal : méthode d’Edman

<strong>Fig. 1.</strong> Profil d’élution HPLC du mélange de 19 acides aminés dérivatisés standard donnant les temps de rétention standard. Les X indiquent les sous-produits de la technique de dégradation d’Edman.
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La technique de dégradation d’Edman comprend les étapes successives suivantes (i) dérivatisation de l’extrémité N de la protéine par réaction du groupement amine avec le phénylisothiocyanate (PITC), (ii) clivage de l’acide aminé modifié et (iii) analyse par HPLC en phase inverse avec détection UV à 270nm. 

La comparaison des profils successifs à ceux d’un échantillon standard d’acides aminés dérivatisés permet d’identifier la séquence.

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