Expression protéique chez E. coli

Escherichia coli est l'un des hôtes les plus utilisés pour l'expression hétérologue des protéines. Les caractères génétiques sont beaucoup mieux établis que dans la cas de tout autre micro-organisme.

 
Description du service

Tous les services comprennent de multiples étapes allant du gène à la protéine purifiée, tel que décrit dans le tableau ci-dessous.

Le processus de production se déroule sur environ 7-10 semaines.

Description Resulting Material Average turnaround (*)
Gene Synthesis Stage
-Codon optimization
-Gene synthesis
-Cloning in standard pUC plasmid
-Complete sequencing
Cloned, synthesized and verified gene 1-2 weeks
Subcloning in Expression Vector Stage
-Plasmid prep
-Subcloning in expression vector
-Clone selection
-Complete sequencing
Expression vector with cloned target gene 2-3 weeks
Pilot Expression Stage
-Expression vector prep
-Transformation using 3 different strains
-Protein induction and optimzation experiments
-Determine yields and protein behavior
10-50 µg of semi-purified protein 2-3 weeks
Expression and Purification Stage
-Expression of bacterial culture
-Protein extraction
-Protein purification
-SDS-PAGE, WESTERN blot
0.5-5 mg of purified protein
Purity >80% or >90%
2-3 weeks

(*) Average production time for average difficult project. Actual turn around time varies with individual project features.

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