Para la investigación
Si no se dispone de la proteína para la inmunización, se puede diseñar de su secuencia péptidos de 10 a 25 aa capaces de ser utilizados como haptenos para generar anticuerpos.
Genosphere Biotechnologies propone la producción de anticuerpos policlonales a tarifas competitivas. Indiquenos la secuencia de su péptido y la especie escogida y le entregaremos antisueros, con título elevado, dentro de 14 semanas. Podemos ayudarle en la búsqueda y la elección de la secuencia de su péptido. Genosphere Biotechnologies produce, desde muchos años, toda clase de péptidos y de péptidos conjugados (a KLH, BSA, OVA…), de calidad controlada, para la inmunización (pureza 70-90%).
Aunque numerosos otros factores influyan la calidad final de los anticuerpos, la calidad del péptido sintético es uno de los puntos críticos en la obtención de anticuerpos específicos.
La oferta estándar de producción de anticuerpos antipéptido comprende:
De otro modo, podemos seguir su propio procedimiento o diseñar protocolos específicos, acordes con su necesitad, que incluyen, por ejemplo, sangrías a periodos diferentes, un mayor número de animales, o varias especies simultáneamente. Es posible prolongar todos los proyectos más tiempo que el previsto al principio para recoger antisuero adicional.
Péptidos sintéticos son de tamaño demasiado pequeño para inducir una buena repuesta inmune durante la producción de anticuerpos en animales. Por eso, se utilizan rara vez así como antígenos. Generalmente se asocian covalentemente a una proteína de alto peso molecular antes de ser utilizados como inmunógenos. El éxito de la inmunización y la producción de antisuero de título elevado, con repuesta específica, necesitan un gran razón molar entre el péptido y la proteína portadora y una buena orientación de todos los epítopos peptídicos. Por eso, la calidad del péptido y el control de la conjugación son criterios de mayor importancia en el éxito del proyecto de inmunización.
Por regla general, el péptido debe comprender por lo menos 10 aminoácidos y incorporar una cisteína terminal (en el extremo N- o -C) para la conjugación.
No obstante si sus proyectos necesitan la utilización de secuencias cortas (5 a 10 aa) hemos desarrollado un protocolo especial y eficaz. También es posible conjugar la proteína portadora directamente al grupo amino del extremo N-. No dude en contactarnos, con los detalles de sus proyectos, para obtener más informaciones.
En algunos casos se puede emplear péptidos multiantígenicos (MAP) en lugar de péptidos conjugados a una proteína portadora. Estos MAP contienen 8 o 16 copias de un mismo péptido sintetizado directamente, mediante una resina especial, sobre un núcleo ramificado de lisina. La macromolécula obtenida (10-15 kDa) tiene un percentaje elevado de péptido antígeno y no necesita conjugación a una molécula portadora. Gracias por notar que no se puede utilizar MAP si la secuencia del péptido proviene del extremo-C de la proteína diana.
Se controla la calidad de los péptidos sínteticos por HPLC y espectro de masas. Se siguen las repuestas inmunitarias durante todo el protocolo que puede adaptarse si hace falta. Para cada proyecto, se analizan el antisuero y el suero preinmune de cada animal por ELISA. Garantizamos, como mínimo, un buen título de sus anticuerpos. Los datos ELISA son comunicados en un informe entregado para cada proyecto que indica los procedimientos y los reactivos a fin de permitirle que reproduzca los análisis.
Si no se dispone de la proteína para la inmunización, se puede diseñar, a partir de su secuencia, péptidos de 15 a 20 aa capaces de ser utilizados como haptenos para generar anticuerpos. El diseño se basa en el análisis de la antigenicidad, de la hidrofilicidad, de las estruturas secundarias, de la accesibilidad y por fin en la factibilidad de la síntesis. Uno o varios de los péptidos diseñados se sintetizan y se emplean como epítopos separadamente o simultáneamente para la inmunización. Los anticuerpos generados están así capaces de reconocer a la o las secuencias dentro de la proteína de la que se las dedujo. Mediante algoritmos adecuados, podemos analizar su proteína y someter a su elección varios péptidos posibles para sus proyectos de anticuerpos.