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DNA-Sequenzierung
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| Willkommen zu unserer
Bio-Analyse-Abteilung
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Bild 1. Fluoreszenz-Sequenzierung, Leuchtstoffsignal der
markierten DNA-Fragmente (Elektrophoregram).
Unsere Angebote
Sequenzierung durch einzelnen Durchlauf.
Dies ist die Basisleistung für eine schnelle und preiswerte Kennzeichnung
einer kürzen Sequenz aus einem einzelnen DNA/Köder Paar. Das
Paar besteht aus den folgenden Eigenschaften:
• Lesen von 400-600 Basen nach DNA-Qualität.
• Verschiedene DNA-Typen : Plasmide, PCR-Fragmente, "Phage"-DNA.
• Die Leistung umfasst die Lieferung universaler Oligonukleotide
(M13, T3, T7, SP6, pBluescript, pGEM, usw ...).
• Die Ergebnisse werden per Email und Post geschickt.
Einzeln-Faser Sequenzierung-Leistung
Diese Leistung ist optimal für die Kennzeichnung langer
Sequenzen (bis 7kb), wenn die Daten verlegt werden sollen. Diese Leistung
besteht aus den folgenden Eigenschaften:
• Die Sequenzierung wird auf einer einzelnen Faser durchgeführt.
• Verschiedene DNA-Typen: Plasmiden, PCR-Fragmente , "Phage"-DNA,
Cosmiden
• Methode "Vorgehen auf DNA" mit der fortschrittlichen Synthese
neuer Auftakten, Ausrichtung und Abbedeckung der Sequenzen.
• Synthese und Reinigung sämtlicher eingeschlossenen Auftakten.
• Die Ergebnisse werden per Email und ein Bericht wird später
per Post geschickt.
Doppelt-Faser Sequenzierung-Leistungen, für Veröffentlichung:
• Komplette Sequenzierung der zwei Fasern.
• Alle DNA-Typen: Plasmiden, PCR-Fragmente, "Phage"-DNA, Cosmiden,
BACs
• "Marche"-Methode oder Unter-Klonen der DNA
• Alle Probleme sind gelöst, die Ergebnisse werden bewährt
• Synthese und Reinigung aller umgefassten Auftakten.
• Die Ergebnisse werden per Email und ein Bericht wird später
per Post geschickt.
Ihre Proben
Die Qualität der herauskommenden Daten hängt
weitgehend von der Qualität Ihrer DNA-Proben ab, und nur Sie können
das ändern. Ihre DNA sollte:
1. genau quantifiziert sein
2. angemessen für eine enzymatische Reaktion vorbereitet
sein.
(siehe auch Technical
Notes (englisch))
Reinigung und Probeform
Plasmiden
Die im Handel erhältlichen chemischen Angebote, die eine
"Spalte"-Reinigungsphase beinhalten, ergeben normalerweise Plasmiden guter
Qualität für die Sequenzierung.
Sie können in Lösung im Wasser sein (TE-Puffer
bitte vermeiden) mit einer minimalen Konzentration von 0,1 µg /
µL, oder auch als Präzipitation.
Im Falle einer Präzipitation im Äthanol, ergibt
sich eine Reinigung des Bodenansatzes mit 70%-Äthanol als hoch wichtig.
PCR-Fragmente
Die PCR-Reaktionsmischung muss durch Agarosegelelektrophorese
getrennt werden. Die Streife, die Ihr Interesse trifft, sollte ausgeschnitten
werden und das DNA-Fragment extrahiert (Elektroelution, kommerzielle Produkte ...).
Lambda, Cosmiden, BACs
Protokolle sollten sehr sorgfältig respektiert werden um
eine Co-Reinigung chromosomaler DNA zu vermeiden. Die Probe wird dann
im Wasser bei einer minimalen Konzentration von 0,5µg/µL solubilisiert.
Erforderten Mengen
Setzen
Sie
die Größe ein |
Für
ein Einzel-Überschreiten |
Für
die gesamte Sequenzierung |
| Plasmide (<5 Kbs) |
2 bis 3 µg / Reaktion |
5 µg / 1,5 Kbs |
| PCR-Produkt (<3 Kbs) |
0,5 bis 1µg / Reaktion |
1µg / Kbs |
| Geklonte 5 bis 10 Kbs |
5 µg |
30 µg |
| Geklonte 10 bis 20 Kbs |
5 bis 10 µg |
50 µg |
| > 20 Kbs und BACs |
Kontaktieren Sie uns bitte |
Wenn Sie spezifische Auftakten / Oligonukleotide
benutzen wollen.
Wir benötigen 10 bis 20 µL einer 10 µM-konzentrierten
Wasserlösung. Zeigen Sie bitte auch die Sequenz der gesendeten Auftakten
an. Bitte merken, dass die degenerierten Auftakten /Oligonukleotide nicht
anwendbar sind.
Schlussbemerkung
Proben werden nicht zurückgeschickt und werden nur einen
Monat vor Zerstörung aufbewahrt.
Bestellinformationen
(siehe auch Verkaufsbedingungen)
Unsere Preise stehen auf der Seite: Preisangaben
Wenn sie einen kompletten Sequenzierung-Auftrag oder eine
große Probenmenge mit einfachem Durchlauf haben, treten Sie bitte
mit uns in Verbindung, um ein spezielles Preisangebot zu bekommen. Um
eine Schätzung Ihres Projekts zu bekommen, steht einen Online Kostenvoranschlagsformular zu Ihrer Verfügung.
Aber wenn Sie uns direkt eine Email oder ein Telefax schicken
wollen, oder nur anrufen wollen, brauchen wir folgende Informationen,
um Ihre Anfrage bestens bearbeiten zu können:
(i) Typ und Quelle der DNA (Name des im Handel erhältlichen
Plasmids)
(ii) Länge der Ziel-Sequenz oder Zahl der Reaktionen
(iii) Die gewünschte Leistung
Alle unseren Kostenvoranschläge werden per Telefax
geschickt.
Sie können Ihre Probe in einem Polsterumschlag mit
Ihrem Bestellformular und ein Schreiben, das die Auftakten angibt, für
die Sie möchten, dass die von uns benutzt werden, sowie die Beschreibung
Ihrer DNA (Name des ursprünglichen Kommerzielvektors, Einsatzgröße,
Gesamtgewicht, Konzentration und Menge, Lösungssorte).
Senden Sie bitte Ihr Antigen per Post oder Kurierdienst
zur folgenden Anschrift:
GENOSPHERE BIOTECHNOLOGIES
Abteilung Protein-Sequenzierung
2 rue des Gravilliers
75003 Paris
Frankreich
Tel. : 01 42 71 70 21
Der Empfang wird Ihnen per E-Mail bestätigt.
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